1. Échantillons d'ADN:
OD260 / 280 = 1,6-1.8
Concentration ≥ 10 ng / μl
Volume ≥ 10 μl
Expédié sur de la glace (packs de glace)
2. Échantillons d'ARN:
OD260 / 280 = 1,8-2.0
Concentration ≥ 20 ng / μl
Volume ≥ 20 μl
Expédié sur de la glace (glace sèche)
3. Primers DDPCR:
Concentration = 450 nm-900 nm
4. sonde DDPCR:
Concentration = 250 nm
1. Exécutez le fichier de configuration en mode administrateur
2. Définissez l'anglais comme langue par défaut
Concentration d'échantillon extrêmement faible. Pour une limite positive, il est nécessaire de procéder à une analyse en profondeur en combinaison avec des matériaux de contrôle de qualité négatifs / positifs
La ou les déformations cibles pourraient avoir été mutées, faible efficacité d'extraction d'acide nucléique.
Pour l'utilisation de réactifs tiers, il est nécessaire d'optimiser et de vérifier avec le système DPCR de la Rainsure. Certains paramètres incluent la concentration d'amorces et de sondes, la compatibilité des enzymes avec l'huile de génération de gouttelettes de plurie et le profil de cyclisme thermique.
Ceci est largement lié à l'erreur expérimentale (manipulation). Il est recommandé de placer la pipette verticalement avec la pointe contre le bas de l'échantillon dans la cartouche lors de l'ajout du MasterMix pour éviter de créer des bulles d'air dans l'échantillon. Si des bulles d'air apparaissent dans l'échantillon, de grandes bulles seront créées lors de la génération de gouttelettes, ce qui entraîne un nombre réduit de gouttelettes.
N'oubliez pas non plus d'ajouter de l'huile d'abord, puis d'ajouter le MasterMix pour assurer une génération de gouttelettes réussie. Néanmoins, il est toujours important d'examiner les marchandises à réception et de surveiller votre température de stockage pour exclure la qualité compromise en raison de la logistique et du stockage.
1. La puce est laissée trop longtemps (> 10 minutes) après l'ajout d'huile de génération de gouttelettes
2 IntRoduction des bulles pendant l'ajout d'échantillon
3. Précision de pipetage
4. Nonfaireding huile mais Mastermix en premier
