Introduction de la littérature | Rainsure Technologie de PCR numérique et Typage Multitype Plasmodium et surveillance quantitative du traitement

Nombre Parcourir:0     auteur:Éditeur du site     publier Temps: 2022-12-15      origine:Propulsé

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Introduction de la littérature | Rainsure Technologie de PCR numérique et Typage Multitype Plasmodium et surveillance quantitative du traitement

Titre: Un test multiplex rapide des parasites du paludisme humain par PCR numérique

Doi: 10.1016 / j.cca.2022.12.001

Journal: Clinica Chimica Acta

Unité: Hospital Huashan affilié à l'Université Fudan

Publié: décembre 2022

Plateforme de recherche: Système de PCR numérique Scientific Dropdx-2044


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En décembre 2022, l'équipe de Ming Guan et Haoqin Jiang de l'hôpital Huashan affiliées à l'Université Fudan ont publié l'article 'Un test multiplex rapide de parasites du paludisme humain par PCR numérique ' dans la revue 'Clinica Chimica Acta '.


Cette étude a établi un nouveau système de PCR numérique multiplex axé sur la détection moléculaire rapide d'une infection du paludisme à faible concentration. Il convient au diagnostic d'une infection mixte du paludisme et à une surveillance continue de plusieurs échantillons, et en tant que méthode de détection clinique importante pour la quantification absolue des agents pathogènes, pour assurer un diagnostic rapide et précis des patients soupçonnés d'une infection du paludisme. La sensibilité analytique de la PCR multiplex est aussi faible que 0,557copies / μL, la sensibilité est de 98,0%, et la spécificité est à 100%, ce qui convient particulièrement au diagnostic d'une infection du paludisme à faible concentration et à la surveillance de l'effet curatif pendant le traitement.


Contexte de recherche

Le paludisme, le sida et la tuberculose sont reconnus dans le monde entier comme l'un des trois principaux problèmes publics qui mettent en danger la vie humaine et la santé. Ils sont une maladie parasite causée par le plasmodium et transmise par les moustiques d'Anopheles. Selon le dernier rapport mondial du paludisme, il y a environ 241 millions de cas de paludisme dans le monde et 627 000 décès par paludisme. Par rapport à l'année précédente, il y avait environ 14 millions de nouveaux cas et 69 000 nouveaux décès.


Plasmodium est une spore transmise par le moustique d'Anopheles et est l'agent causal du paludisme. Quatre principaux types de plasmodium qui parasitent le corps humain, y compris Plasmodium vivax, Plasmodium malariae, Plasmodium falciparum et Plasmodium ovale. Ces parasites du paludisme ont deux hôtes, les moustiques Anopheles et les humains. Ils parasitent successivement dans les cellules hépatiques et les globules rouges chez l'homme. Dans les érythrocytes, en plus de la prolifération des schizophytes, certains mérozoïtes forment des gamétophytes et commencent le développement initial de la reproduction sexuelle.


En 2021, avec zéro cas de paludisme indigène en quatre ans, la Chine a été reconnue avec succès par l'Organisation mondiale de la santé (OMS) en tant que pays sans paludisme. À l'heure actuelle, les cas d'infection du paludisme sont principalement importés de l'étranger.


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Méthodes de recherche

Au total, 39 patients positifs sur le paludisme diagnostiquées par microscopie ont été sélectionnés parmi l'hôpital Huashan de 2016 à 2021; 70 échantillons de sang ont été prélevés sur ces patients. De plus, 20 personnes en bonne santé, 20 patients fébriles et 6 patients avec d'autres types de parasites infectés par le sang ont été inclus dans cette étude. Chaque échantillon de sang a été testé en parallèle par frottis sanguin et DPCR. En optimisant le système de détection de sonde à étiquette fluorescent quadruple à système unique, la capacité quantitative précise du DPCR a été vérifiée et le nombre de copies précis par unité de volume d'échantillons de sang clinique du paludisme a été sorti. Un test de diagnostic rapide a également été utilisé pour valider les résultats obtenus par le DPCR.



Résultats de la recherche

Le système DPCR permet un diagnostic rapide et une quantification des échantillons d'ADN du paludisme. La sensibilité analytique du DPCR multiplex était aussi faible que 0,557 copies / μL (IC à 95% 0,521-0,607), et sa sensibilité pour le diagnostic des échantillons cliniques était de 98,0%, et sa spécificité était de 100%. De plus, trois échantillons de co-infection à plasmodium multiples ont été détectés par le système DPCR, y compris un cas de co-infection triple plasmodium. En testant en continu des échantillons de sang quotidiens des 39 patients de l'étude, le DPCR peut surveiller l'efficacité des traitements médicamenteux. Les résultats montrent que la plage de concentration de l'ADN de Plasmodium falciparum après médicament est de 0 copie / μL-5474 Copy / μL, réalisant la surveillance en temps réel de l'effet curatif des médicaments antipaludiques. L'étude a également révélé que le plasmodium était plus facilement et plus positivement détecté à l'aide d'échantillons de cellules sanguines appauvris par le plasma que le sang total.


Le système de PCR numérique multiplex peut clairement détecter deux ou trois types d'échantillons de sang total d'infection par le paludisme, pour diagnostiquer efficacement plusieurs infections mixtes sur le paludisme. Il s'agit d'un complément idéal à la méthode d'examen microscopique traditionnel du sang, qui peut compenser en temps opportun la détection manquée du paludisme atypique dans les frottis sanguins et les patients atteints d'infection mixte à faible concentration, aidant ainsi les cliniciens à ajuster en temps opportun les schémas thérapeutiques.


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La surveillance continue d'un patient jusqu'à 20 jours a montré que la PCR numérique peut quantifier avec précision la concentration du paludisme dans le sang total du patient, montrer visuellement le statut d'infection réel du patient et refléter le changement du taux d'infection par le paludisme chez le patient dans le temps, pour fournir des preuves plus fiables pour l'élimination de l'efficacité des médicaments anti-malares.


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