Présentation de la littérature |Technologie de PCR numérique Rainsure et surveillance quantitative du typage et du traitement du plasmodium multitype

_{Titre : Un test multiplex rapide des parasites du paludisme humain par PCR numérique}

_{DOI : 10.1016/j.cca.2022.12.001}

_{Revue: Clinica Chimica Acta}

_{Unité : Hôpital Huashan affilié à l'Université Fudan}

_{Publié : décembre 2022}

_{Plateforme de recherche : système de PCR numérique Rainsure Scientific DropDx-2044}

_{En décembre 2022, l'équipe de Ming Guan et Haoqin Jiang du Huashan Hospital Affiliated to Fudan University a publié l'article 'A rapid multiplex assay of human malaria parasites by digital PCR' dans la revue 'Clinica Chimica Acta'.}

_{Cette étude a établi un nouveau système de PCR numérique multiplex axé sur la détection moléculaire rapide de l'infection palustre à faible concentration.Il convient au diagnostic de l'infection paludéenne mixte et à la surveillance continue de plusieurs échantillons, et en tant que méthode de détection clinique importante pour la quantification absolue des agents pathogènes, afin d'assurer un diagnostic rapide et précis des patients suspectés d'infection palustre.La sensibilité analytique de la PCR multiplex est aussi faible que 0,557 copies/μL, la sensibilité est de 98,0 % et la spécificité est de 100 %, ce qui est particulièrement adapté au diagnostic de l'infection palustre à faible concentration et à la surveillance de l'effet curatif pendant le traitement. .}

_{Fond de recherche}

_{Le paludisme, le sida et la tuberculose sont reconnus dans le monde entier comme l'un des trois principaux problèmes publics qui mettent en danger la vie et la santé humaines.Il s'agit d'une maladie parasitaire causée par Plasmodium et transmise par les moustiques anophèles.Selon le dernier rapport mondial sur le paludisme de l'OMS, il y a environ 241 millions de cas de paludisme dans le monde et 627 000 décès dus au paludisme.Par rapport à l'année précédente, il y a eu environ 14 millions de nouveaux cas et 69 000 nouveaux décès.}

_{Plasmodium est une spore transmise par le moustique anophèle et est l'agent causal du paludisme.Quatre principaux types de Plasmodium qui parasitent le corps humain, notamment Plasmodium vivax, Plasmodium malariae, Plasmodium falciparum et Plasmodium ovale.Ces parasites du paludisme ont deux hôtes, les moustiques anophèles et les humains.Ils parasitent successivement les cellules hépatiques et les globules rouges chez l'homme.Dans les érythrocytes, en plus de la prolifération des schizophytes, certains mérozoïtes forment des gamétophytes et commencent le développement initial de la reproduction sexuée.}

_{En 2021, avec zéro cas de paludisme autochtone en quatre ans, la Chine a été reconnue avec succès par l'Organisation mondiale de la santé (OMS) comme un pays exempt de paludisme.À l'heure actuelle, les cas d'infection palustre sont principalement importés de l'étranger.}

_{Méthodes de recherche}

_{Au total, 39 patients atteints de paludisme diagnostiqués par microscopie ont été sélectionnés à l'hôpital de Huashan de 2016 à 2021 ;70 échantillons de sang ont été prélevés chez ces patients.De plus, 20 personnes en bonne santé, 20 patients fébriles et 6 patients avec d'autres types de parasites infectés par le sang ont été inclus dans cette étude.Chaque échantillon sanguin a été testé en parallèle par frottis sanguin et dPCR.En optimisant le système unique de détection de sonde quadruple marquée par fluorescence, la capacité quantitative précise de la dPCR a été vérifiée et le nombre de copies précis par unité de volume d'échantillons sanguins cliniques de paludisme a été produit.Un test de diagnostic rapide a également été utilisé pour valider les résultats obtenus par dPCR.}

_{Résultats de recherche}

_{Le système dPCR permet un diagnostic et une quantification rapides des échantillons d'ADN du paludisme.La sensibilité analytique de la dPCR multiplex était aussi faible que 0,557 copies/μL (IC à 95 % 0,521-0,607), et sa sensibilité pour le diagnostic des échantillons cliniques était de 98,0 %, et sa spécificité était de 100 %.De plus, trois échantillons de co-infections multiples à Plasmodium ont été détectés par le système dPCR, dont un cas de triple co-infection à Plasmodium.En testant en continu des échantillons de sang quotidiens des 39 patients de l'étude, la dPCR peut surveiller l'efficacité des traitements médicamenteux.Les résultats montrent que la plage de concentration de l'ADN de Plasmodium falciparum après la médication est de 0 copie/μL-5474 copie/μL, réalisant une surveillance en temps réel de l'effet curatif des médicaments antipaludiques.L'étude a également révélé que Plasmodium était plus facilement et plus positivement détecté à l'aide d'échantillons de cellules sanguines appauvries en plasma que de sang total.}

_{Le système de PCR numérique multiplex peut clairement détecter deux ou trois types d'échantillons de sang total d'infection mixte de paludisme, pour diagnostiquer efficacement plusieurs infections mixtes de paludisme.Il s'agit d'un complément idéal à la méthode traditionnelle d'examen microscopique des frottis sanguins, qui peut compenser en temps opportun la détection manquée du paludisme atypique dans les frottis sanguins et les patients infectés par des infections mixtes à faible concentration, aidant ainsi les cliniciens à ajuster les schémas thérapeutiques en temps opportun.}

_{La surveillance continue d'un patient jusqu'à 20 jours a montré que la PCR numérique peut quantifier avec précision la concentration de paludisme dans le sang total du patient, montrer visuellement l'état réel de l'infection du patient et refléter l'évolution du taux d'infection palustre chez le patient dans le temps , permettant de surveiller en temps réel l'efficacité des médicaments antipaludiques, est de fournir des preuves de laboratoire plus fiables pour l'élimination du paludisme chez les patients.}